(Application) L’hydrolyse de l’amidon

L’hydrolyse de l’amidon est une application qui permet d’explorer les conditions influençant la dégradation de l’amidon par l’amylase salivaire.
Matériel virtuel : 4 tubes à essai vides au départ avec deux solutions à ajouter : empois d’amidon ou eau distillée
Des réactifs : eau iodée, HCl, bandelettes tests. Les résultats accessibles toutes les 5 minutes
4 types de tests proposés :
– Température (curseur réglable à 3, 33, 37, 40 ou 90°C)
– pH (température fixe à 37°C)
– Spécificité enzymatique (température fixe à 37°C)
- Catalyse chimique (avec le même curseur de température que pour le test 1)

Les objectifs pédagogiques sont de montrer que l’amylase agit sur l’amidon mais pas sur l’eau, mettre en évidence les conditions optimales d’activité enzymatique (température, pH) et comparer action enzymatique vs catalyse chimique.
Auteur : Fabrice Pellegrin

1. Test de la température
Objectif : observer l’influence de la température sur l’activité de l’amylase.
Température réglable via un curseur : 3°C, 33°C, 37°C, 40°C, 90°C.
Manip à faire :
– Dans chaque tube, ajouter empois d’amidon + amylase
– Placer chaque tube à une température différente
– Suivre l’évolution toutes les 5 minutes avec de l’eau iodée (test de la présence d’amidon)
Résultat attendu :
Activité optimale vers 37°C
Aucune activité à 3°C ou 90°C

2. Test du pH
Objectif : observer l’influence du pH sur l’activité enzymatique.
Température fixe à 37°C
Manip à faire :
– Préparer des milieux de pH différents (acide, neutre, basique) avec l’ajout d’HCl ou autre tampon (soude)
– Ajouter dans chaque tube empois d’amidon + amylase
– Observer la dégradation de l’amidon avec l’eau iodée au fil du temps
Résultat attendu :
– Activité maximale au pH neutre ( 7)
– Activité inhibée en milieu trop acide ou trop basique

3. Test de spécificité enzymatique
Objectif : Vérifier que chaque enzyme agit spécifiquement sur son substrat :
L’amylase sur l’amidon
La saccharase sur le saccharose
Température fixe à 37°C
Manip à faire :
– Dans un tube 1 : empois d’amidon + amylase
– Dans un tube 2 : eau distillée + amylase
– Dans un tube 3 : eau+saccharose + amylase
– Dans un tube 4 : eau+saccharose + saccharase
Tester ensuite :
Tubes 1 à 3 avec eau iodée : observe si l’amidon est encore présent (coloration bleue/noire)
Tubes 3 et 4 avec bandelettes à glucose : détection de glucose issu de l’hydrolyse du saccharose
Résultat attendu :
– Tube 1 : décoloration avec eau iodée → amidon hydrolysé → action spécifique de l’amylase
– Tube 2 : rien ne change → pas de substrat → aucune action
– Tube 3 : pas de glucose détecté → l’amylase n’agit pas sur le saccharose → spécificité
– Tube 4 : glucose détecté → saccharose hydrolysé → spécificité de la saccharase
Chaque enzyme n’agit que sur son substrat spécifique : L’amylase hydrolyse l’amidon, mais pas le saccharose et la saccharase hydrolyse le saccharose, mais pas l’amidon.

4. Test de catalyse chimique
Objectif : Étudier l’hydrolyse chimique de l’amidon par un acide, et comparer théoriquement avec l’action enzymatique de l’amylase.
Manip à faire :
– Préparer plusieurs tubes contenant empois d’amidon + HCl à différents pH (1, 3, 5).
– Chauffer les tubes à différentes températures (ex. 25°C, 37°C, 60°C).
– Prélever des échantillons régulièrement et tester à l’eau iodée :
Bleu/noir → amidon présent
Décoloration → amidon hydrolysé
Résultat attendu :
– L’acide (HCl) hydrolyse l’amidon lentement, selon le pH et la température.
– Hydrolyse maximale attendue à pH très acide (pH 1) et température élevée.